貓細(xì)小病毒抗體elisa檢測(cè)試劑盒競(jìng)爭法的簡要操作步驟
點(diǎn)擊次數(shù)：1276 更新時(shí)間：2020-09-17
貓細(xì)小病毒抗體elisa檢測(cè)試劑盒競(jìng)爭法的簡要操作步驟：
1）先加入特異性抗原，使抗原固定結(jié)合于載體表面；
2）加入梯度濃度比例的待測(cè)樣品與酶標(biāo)抗體混合物，并做只加酶標(biāo)抗體的對(duì)照組；
3）加入酶促反應(yīng)底物，發(fā)生顯色反應(yīng)，對(duì)比實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組的顯色差異，計(jì)算未知抗體的量。
競(jìng)爭法測(cè)抗體的反應(yīng)模式與競(jìng)爭法測(cè)抗原類似。用特異性抗原進(jìn)行包被和制備酶結(jié)合物，以檢測(cè)相應(yīng)的抗體。當(dāng)抗原材料中的干擾物質(zhì)不易除去，或不易得到足夠的純化抗原時(shí)，可用此法檢測(cè)特異性抗體。其原理為標(biāo)本中的抗體和一定量的酶標(biāo)抗體競(jìng)爭與固相抗原結(jié)合。標(biāo)本中抗體量越多，結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗體愈少，因此陽性反應(yīng)呈色淺于陰性反應(yīng)。如抗原為高純度的，可直接包被固相。競(jìng)爭法測(cè)抗體有多種模式，可將標(biāo)本和酶標(biāo)抗體與固相抗原競(jìng)爭結(jié)合，抗HBc ELISA一般采用此法。另一種模式為將標(biāo)本與抗原一起加入到固相抗體中進(jìn)行競(jìng)爭結(jié)合，洗滌后再加入酶標(biāo)抗體，與結(jié)合在固相上的抗原反應(yīng)。抗HBe的檢測(cè)一般采用此法。
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